Corso di laurea magistrale in Chimica Clinica Forense e dello Sport

Conoscenze basilari nel campo della chimica analitica

Il corso intende fornire le competenze sulle metodologie analitiche
(strumentali e non) particolarmente impiegate nei laboratori di chimica
analitica clinica e forense e ad integrazione delle conoscenze acquisite
nel corso della laurea triennale in chimica. Inoltre sono prese in
considerazione le problematiche principali che condizionano l’esito di un
esame di laboratorio su campioni biologici e forensi. Le potenzialità e le
criticità delle varie metodologie sono illustrate dai numerosi esempi di
determinazione su matrici biologiche complesse.

MODULO A - CHIMICA ANALITICA CLINICA

Principali problematiche che condizionano l'esito di un esame di
laboratorio sul campione biologico. Potenzialità e le criticità delle varie
metodologie, riferite in particolare alla determinazione di analiti in fluidi
biologici

MODULO B - CHIMICA ANALITICA CROMATOGRAFICA E FORENSE

Apprendimento dei principi di funzionamento della moderna
strumentazione scientifica per l'analisi di tracce, in termini di
funzione/funzionamento, di fenomenologia fisica implicata e di
prestazioni analitiche

Colloquio orale

 MODULO A - CHIMICA ANALITICA CLINICA

Finalità dell’esame chimico-clinico. Accettazione del paziente, raccolta
del campione biologico. Variabilità pre-analitica. Intervalli di riferimento,
sensibilità e specificità diagnostica. Curve ROC. Ioni inorganici, elementi
in tracce, equilibrio acido-base e gas del sangue. Proteine. Enzimi e
diagnostica enzimatica. Misure di diffusione della luce, turbidimetria e
nefelometria. Altri fenomeni di luminescenza. Chemiluminescenza e
bioluminescenza. Luminometri. Impiego di sostanze fluorescenti e
chemiluminescenti in chimica analitica clinica. Radioattività: metodi di
misura, contatori a scintillazione e precisione delle misure.
Metodi immunochimici. Reazione antigene-anticorpo in soluzione e all’
interfaccia liquido solido. Immunodiffusione in gel: immunodiffusione
r a d i a l e , e l e t t r o i m m u n o d i f f u s i o n e , i m m u n o e l e t t r o f o r e s i ,
immunoturbidimetria e immunonefelometria. Metodi immunochimici con
marcatori: metodi competitivi e non competitivi. Natura e proprietà dei
principali marcatori utilizzati (radioisotopi, enzimi, fluorofori, molecole
chemiluminescenti, particelle).
Point of care tests. Principi costruttivi delle strisce reattive e loro
funzionamento. Reazioni enzimatiche e reazioni immunochimiche.
Rivelazione visiva semiquantitativa. Principi della determinazione
quantitativa mediante fotometria di riflettanza. Cenni di diagnostica
molecolare
Endocrinologia: ormoni, struttura, regolazione e produzione. Meccanismo
d’azione e funzioni. Ormoni ipofisari, tiroidei, pancreatici, steroidei.
Marcatori specifici: enzimi, ormoni, antigeni oncofetali, carboidrati,
proteine, marcatori genetici, altri marcatori. Marcatori di infettività.
Natura e classificazione. TORCH (toxoplasma, rubella, citomegalovirus,
herpes virus). Marcatori per epatite e marcatori per infezioni da HIV.

MODULO B - CHIMICA ANALITICA CROMATOGRAFICA E FORENSE

La separazione cromatografica: partizione ed adsorbimento;
cromatografia zonale e frontale. Teorie del processo cromatografico:
cromatografia lineare, non-lineare, isoterme di adsorbimento. Parametri
caratteristici del picco cromatografico. Modello del piatto teorico.
Risoluzione ed efficienza della separazione. Equazioni di Golay e Van
Deemter.
La fase stazionaria: silice, polimeri organici, materiali bimodali, grafted
layers, colonne monolitiche.
Cromatografia su fase inversa: principi e applicazioni, cromatografia ad
interazione idrofobica, cromatografia ad interazione idrofila.
Scambio ionico: principi ed applicazioni, cromatografia a scambio di
legante. Cromatografia ad esclusione dimensionale.
Cromatografia di affinità: principi ed applicazioni. Dye-affinity
chromatography. Cromatografia di immunoaffinità. Applicazioni
separative dei polimeri a stampo molecolare.
Elettroforesi capillare: principi fondamentali, teoria dell'elettromigrazione,
rivelatori. Il capillare: silice, coating covalenti, coating dinamici, gels, solgel,
monoliti polimerici. Elettoforesi capillare: tecniche separative (in fase
libera, in gel, elettrocromatografia micellare e in microemulsione,
elettrocromatografia capillare).
Cenni di tecniche avanzate di pretrattamento ed estrazione dei campioni.
Applicazioni forensi delle tecniche separative cromatografiche ed
elettroforetiche

Il materiale didattico presentato a lezione è disponibile presso il docente
sottoforma di diapositive in formato pdf e/o powerpoint.
Non si consigliano particolari testi base, ed è cura del docente qualora
necessario fornire copia di pubblicazioni scientifiche e di reviews in
formato pdf.

Frequenza facoltativa